Diagnosis of Mycosphaerella spp., responsible for Mycosphaerella leaf spot diseases of bananas and plantains, through morphotaxonomic observations

¹ CIRAD-Bios, UMR BGPI, TA A 54 / K, 34398, Montpellier Cedex 5, France
² CIRAD-Bios, UPR Mult. Vég., Stn. Neufchâteau, 97130, Capesterre Belle-Eau, Guadeloupe, France

Corresponding author: catherine.abadie@cirad.fr

Abstract

Introduction. This protocol aims to diagnose under laboratory conditions the main Mycosphaerella spp. pathogens of bananas and plantains. The three pathogens Mycosphaerella fijiensis (anamorph Paracercospora fijiensis), M. musicola (anamorph Pseudocercospora musae) and M. eumusae (anamorph Pseudocercospora eumusae) are, respectively, the causal agents of Black Leaf Streak disease, Sigatoka disease and Eumusae Leaf Spot disease. The principle, key advantages, starting plant material and time required for the method are presented. Materials and methods. The laboratory materials required and details of the thirteen steps of the protocols (tissue clearing and in situ microscopic observations, isolation on artificial medium and cloning of single-spore isolate, in vitro sporulation and microscopic observations of conidia, and long-term storage of isolates) are described. Results. Diagnosis is based on the observations of anamorphs (conidiophores and conidia) which can be observed directly from banana leaves or after sporulation of cultivated isolates if sporulating lesions are not present on banana samples.

Résumé

Introduction. Le protocole vise à diagnostiquer, en laboratoire, les principales espèces de Mycosphaerella pathogènes des bananiers et plantains. Les trois agents pathogènes Mycosphaerella fijiensis (anamorphe de Paracercospora fijiensis), M. musicola (anamorphe de Pseudocercospora musae) et M. eumusae (anamorphe de Pseudocercospora eumusae) sont respectivement responsables de la maladie des raies noires, de la maladie de Sigatoka et de la cercosporiose due à eumusae. Le principe, les principaux avantages, le matériel végétal et le temps nécessaires à la méthode sont présentés. Matériel et méthodes. Le matériel de laboratoire nécessaire et le détail des treize étapes de réalisation du protocole (prélèvement des tissus et observations microscopiques in situ, isolement sur milieu artificiel et clonage d’isolats monosporés, sporulation in vitro et observations microscopiques des conidies, conservation à long terme des isolats) sont décrits. Résultats. Le diagnostic est basé sur les observations des anamorphes (conidiophores et conidies) qui peuvent être observés directement à partir des feuilles de bananes ou après sporulation des isolats mis en culture s’il n’y a pas de lésions sporulantes sur les échantillons de bananiers.